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猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒

猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒

简要描述:猪瘟病毒荧光定量检测试剂盒——探针法 用于定性检测猪血液、唾液、鼻腔分泌物、粪便等样本中的猪病病毒,该猪病以发热、皮肤发绀、淋巴结,肾,胃肠粘膜明显出血为特征,病情短,死亡率高。

产品型号:

所属分类:荧光定量PCR试剂系列

更新时间:2022-04-02

厂商性质:生产厂家

详情介绍

本试剂盒利用实时荧光PCR检测技术,以猪病病毒基因组中的高度保守序列为靶区域,设计特异性引物和TaqMan荧光探针,通过PCR扩增实现对猪病病毒核酸的快速检测。

【主要组成成分】

1.   试剂盒包装组成

序号

组成

规格

用量/个反应

1

2XAvantFast Probe mix

1支,625μl/支

12.5μL

2

引物探针

1支,375μl/支

7.5μl

3

阳性对照

1支,250μl/支


4

阴性对照

1支,250μl/支


【检验方法】

一、 使用前准备:

1.  试剂盒中各组分充分解冻并混匀。

2.  核酸提取尤其是针对RNA时最好采用冷冻高速离心机,操作前请将温度设定在4℃预冷。

3.  推荐使用进口离心管和带滤芯移液器头进行操作,检测过程中使用不带荧光物质一次性乳胶手套。

二、 核酸提取(在样本处理区进行):

1.  按照试剂说明书操作

三、 PCR扩增检测:

1.  配液(在试剂准备区进行):取出扩增反应液,室温融化后充分混匀,短暂离心,并按反应个数分别取反应液和酶按照以下配比配制反应液:(注意应考虑有阳性对照和阴性对照甚至空白对照)

试剂

2XAvantFast Probe mix

引物探针

用量(反应个数为n)

12.5μl×n

7.5μl×n

反应液配制时应充分混匀,短暂离心,按20μl/管分装到PCR反应管中,转移至样本处理区;

2.  加样(在样本处理区进行):分别加入5μl步骤二中处理好的样本、阴性对照、阳性对照,盖好管盖,转移至核酸扩增区;

3.  PCR扩增检测(在核酸扩增区进行):

将反应管置于全自动荧光定量PCR仪样品槽中,荧光通道选Hex,设置扩增反应条件为:

阶段

温度时间循环次数
预变性
95℃2min1
变性95℃10s40
退火和延伸60℃30s





*如果使用ABI系列荧光PCR仪,设置扩增体积为25μl,同时要选择passive referencequenchernone的模式









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